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液相色譜柱選擇準備工作闡述
發布時間:2017-08-22   點擊次數:346次
     在選擇液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等,
    1、樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
    2、如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或矽膠柱,液相色譜柱(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否 則很難重複實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用於其它實驗)
    3、若樣品是堿性的;可選擇高純矽膠柱(高純矽膠缺少金屬雜質,且矽膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留
    4、如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18液相色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用液相色譜柱(矽膠柱在反相條件下使用,這也是很經典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。

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