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液相色譜儀相關知識
發布時間:2017-06-13   點擊次數:740次
液相色譜法是分析化學中發展zui快、應用zui廣的一種分析方法,特別是高效液相色譜儀已經成為生命科學、材料科學、環境科學等方麵必不可少的重要檢測方法。現代科學技術的發展使得分析對象越來越複雜,分析要求越來越高,液相色譜的強大功能使其成為新世紀中解決生命科學、材料科學、環境科學等複雜體係發現難題的zui有力的技術和方法。

高效液相色譜儀是在經典液相色譜的基礎上,引入氣相色譜的理論和技術而發展起來的。在高效液相色譜中,流動相與組分之間有一定的親和力,分離過程的實現是組分、流動相和固定相三者間相互作用的結果,分離不但取決於組分和固定相的性質,還與流動相的性質密切相關,一般情況下,高效液相色譜儀的分析可在室溫下進行,由於采用顆粒極細的固定相,柱內壓降很大,加上流動相黏度高,因此必須采用高入口壓,以此來維持一定的流動相線速。高效液相色譜儀對於揮發性低、熱穩定性差、分子量大的物質特別有利,它在醫藥、生化等方麵具有非常重要的作用。
 
色譜柱的常見問題:

1.色譜柱汙染:
目前,基層實驗室多采用反相色譜柱,要減少色譜柱的汙染zui有效的辦法是要純化樣品。凡是樣品純化得越幹淨,色譜柱的壽命就越長;反之,隻有提取沒有純化的樣品,色譜柱柱效就會大幅下降。一般來說,要提取純化好的樣品,zui好的方法是用流動相溶解樣品,這樣,一方麵能減少色譜圖中的溶劑峰幹擾,另一方麵也能檢查樣品在流動相中的溶解性。如果樣品進樣後在流動相中沉澱,會堵塞進樣器和柱頭,甚至樣品分解,出現鬼峰。如果出現樣品與流動相不溶要設法改變溶解條件,可更換樣品溶劑,或改進樣品純化處理的方法,或濾過去除不溶性物質。
2.色譜柱阻塞與對策
如果配有保護柱,應先去掉保護柱進行分析。如果色譜柱阻塞,可進行反衝洗。如果問題仍然存在,色譜柱可能被強保留的汙染物損壞,建議使用恰當的再生程序。如果問題仍然存在,可能是進口阻塞,更換入口處的篩板或更換色譜柱。如果必要,亦可更換色譜柱。
3.嚴格清場
清洗的過程是延長色譜柱壽命的關鍵,每次分析工作結束時,要做好清場工作。如果流動相是緩衝鹽,先用5%甲醇水衝洗30 min以上;如果流動相是離子對,先用50%甲醇水衝洗30 min以上;如果流動相是酸性溶劑,先用純水衝洗30 min以上,流速0.5 mL#min-1,zui後過度到用色譜甲醇衝洗色譜柱,目的是衝去吸附在柱上的強保留組分。如果用甲醇-水為流動相也應這樣衝洗色譜柱,在一定程度上可恢複柱效。

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